skip to main content

Gambaran Preparat Histologis Hepar Tikus Putih (Rattus norvegicus L.) yang Dibuat Menggunakan Beberapa Fiksatif dan Proses Pencucian

Program Studi Biologi, Departemen Biologi, Fakultas Sains dan Matematika, Universitas Diponegoro, Jl. Prof. Jacob Rais, Tembalang, Semarang 50275, Indonesia

Open Access Copyright 2025 Buletin Anatomi dan Fisiologi

Citation Format:
Abstract

Fiksatif merupakan faktor utama untuk menghasilkan kualitas sediaan histologi yang baik pada proses pembuatan preparat mikroskopis. Fiksasi merupakan tahap pertama pada proses pembuatan sediaan histologi. Pemilihan jenis fiksatif yang digunakan pada proses pembuatan preparat merupakan hal yang penting karena akan berpengaruh pada hasil sediaan histologi. Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis preparat histologis hepar yang dibuat dengan menggunakan beberapa jenis fiksatif dan proses pencucian. Hepar tikus putih dengan ulangan sebanyak 10 kali dibuat preparat  dengan metode parafin dan pewarnaan Hematoksilin-Eosin. Penelitian ini menggunakan fiksatif NBF 10 %, Bouin dan Etanol 50% .Hasil preparat yang difiksasi dengan Etanol 50% hepatosit tidak menunjukkan susunan radier yang teratur, jarak antar sel longgar, banyak sel tidak berinti, sitoplasma terwarnai merah, hepatosit mengecil dengan ukuran 12 ± 0,4 µm. Hepar yang difiksasi dengan Bouin menunjukkan hepatosit tersusun radier dengan jarak yang rapat, inti sel terwarnai ungu, sitoplasma terwarnai merah, hepatosit berukuran normal 15 ± 0,9 µm. Hepar yang difiksasi dengan NBF 10% menunjukkan hepatosit tersusun radier, inti sel terwarnai ungu, sitoplasma terwarnai merah, hepatosit berukuran normal 16 ± 0,2 µm dengan jarak yang rapat. Pada penelitian ini dapat disimpulkan bahwa proses pencucian setelah fiksasi belum mampu membersihkan kelebihan fiksatif Bouin pada preparat hepar, namun menghasilkan preparat histologi hepar dengan gambaran yang baik dengan fiksatif NBF 10%. Etanol 50% tidak sesuai dipakai sebagai fiksatif pada proses pembuatan preparat mikroskopik hepar

 

Fixative is the main factor to produce good quality histological preparations in the process of making microscopic preparations. Fixation is the first stage in the process of making histological preparations. The selection of the type of fixative used in the process of making preparations is important because it will affect the results of histological preparations. This study aims to analyze liver histological preparations made using several types of fixatives and the washing process. The liver of white mice with 10 repetitions was made with paraffin and Hematoxylin-Eosin staining methods. This study used 10% NBF, Bouin and 50% Ethanol fixatives. The results of the preparations fixed with 50% Ethanol hepatocytes did not show a regular radial arrangement, loose intercellular distances, many non-nucleated cells, red-stained cytoplasm, and hepatocytes shrank in size to 12 ± 0.4 µm. Liver fixed with Bouin showed hepatocytes arranged radially with close spacing, cell nuclei stained purple, cytoplasm stained red, normal-sized hepatocytes 15 ± 0.9 µm. Liver fixed with 10% NBF showed hepatocytes arranged radially, cell nuclei stained purple, cytoplasm stained red, normal-sized hepatocytes 16 ± 0.2 µm with close spacing. In this study, it can be concluded that the washing process after fixation has not been able to clean excess Bouin fixative in liver preparations, but produces liver histology preparations with good images with 10% NBF fixative. 50% ethanol is not suitable for use as a fixative in the process of making microscopic liver preparations.

Fulltext View|Download
Keywords: BNF; bouin; etanol; hepatosit
Funding: Fakultas Sains dan Matematika Universitas Diponegoro under contract 25.IV.A/UN7.F8/PP/II/2024

Article Metrics:

  1. Dewi, A. K., C. Anwar, C. & Kumohiro,Y. (2020). Brain structure morphology after being fixated with ethanol on electron microscope Int. J. Morphol., 38(2):305-308
  2. Fajrina, S. N., Ariyadi, T., Nuroini, F. (2018). Gambaran Kualitas Sediaan Jaringan Hati Menggunakan Larutan Fiksatif NBF 10 %dan Alkohol 70% pada Pewarnaan HE (Hematoksilin-Eosin). Prosiding Seminar Nasional Mahasiswa Unimus 1: 60–65
  3. Hariyati, N., Samino, S., Indriyani,S & Soewondo. A. (2017). Mikroteknik Dasar (cetakan pertama) Hal. 85 - 94 Universitas Brawijaya Press
  4. Nowacek, J.M., Kiernan, J. A., Kumar, J.L.(Ed.) (2010). Education Guide: Special Stains and H&E (2nd ed. Pp. 141-142). Dako North America. California
  5. Jiang X, Xu J, Gore, J.C. (2020). Mapping hepatocyte size in vivo using temporal diffusion spectroscopy MRI. Magn Reson Med. 84 (5):2671-2683. doi: 10.1002/mrm.28299
  6. Mardiati, S.T. & Saraswati, T.R. (2014). Buku Penuntun Praktikum Mikroteknik Hewan. Laboratorium Biologi Struktur dan Fungsi Hewan Jurusan Biologi Fakultas Sains dan Matematika Universitas Diponegoro. Semarang. Hal. 2-10
  7. Mescher, A. L. (2016). Junqueira’s Basic Histology Text & Atlas (14th ed.) McGrawHill. Lange. New York. Pp.2-4
  8. Mujimin, M., Suratmi, S. (2013). Teknik mencampur larutan fiksasi untuk histologi. Bul. Tek. Lit. Akuakultur. 11 (2) :137-140
  9. Musyarifah, Z., & Agus, S. (2018). Proses Fiksasi pada Pemeriksaan Histopatologik. Jurnal Kesehatan Andalas. 7(3): 443-452. https://doi.org/10.25077/jka.v7i3.900
  10. Parry, N. 2024. A Beginner’s Guide to Hematoxylin and Eosin Staining. https://bitesizebio.com/13400/a-beginners-guide-to-haematoxylin-and-eosin-staining/
  11. Perry, C., Chung, J.Y., Ylaya, K., Choi, C.H., Simpson A., Matsumoto, K.T., Smith, W.A., & Hewitt, S.M. (2016). A Buffered Alcohol-Based Fixative for Histomorphologic and Molecular Applications. Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 64 (7) 425 – 440
  12. Rahman, M.A., Sultana, N., Ayman, U. Bhakta, S., Afrose, M., Afrin, M., Haque, Z. (2022) Alcoholic fixation over formalin fixation: A new, safer option for morphologic and molecular analysis of tissues. Saudi J Biol Sci. 29(1):175-182. doi: 10.1016/j.sjbs.2021.08.075
  13. Rastogi, V., Puri, N., Arora, S., Kaur, G., Yadav, L., & Sharma, R. (2013). Artefacts: a diagnostic dilemma - a review. J Clin Diagn Res.; 7(10):2408–2413
  14. Rolls, G. (2017). Process of fixation and the nature of fixatives [serial online] https://www.leicabiosystems.com/pathologyleaders/fixation-and-fixatives-1-theprocess-of-fixation-and-the-nature-of-fixatives
  15. Rolls, G. (2024). Fixation and fixatives (3) – fixing agents other than the common Aldehydes https://www.leicabiosystems.com/knowledge-pathway/fixation-and-fixatives-3-fixing-agents-other-than-the-common-aldehydes/
  16. Rusmiatik, 2019. Perbandingan fiksasi larutan bouin dan formalin pada sediaan preparat histologi testis marmot. Jurnal Kedokteran media informasi ilmu kedokteran dan kesehatan.4(2): 5-9
  17. Salsabila,Q., Durachim, A.,Wiryanti, W., Rahmat, M. (2023). Perbandingan kualitas hasil preparat histologi jaringan ginjal dengan fiksasi menggunakan neutral buffer formalin 10% dan etanol 50%. Jurnal Kesehatan Siliwangi. 4(1):327-333
  18. Suvarna, K.S., C.Layton, J. D. Bancroft. (2019) Bancroft’s Theory and Practice of Histological Techniques. Elsevier. Pp. 56-59

Last update:

No citation recorded.

Last update:

No citation recorded.